时间:2020-08-15 05:19:42
1、综合题 现有甲、乙两种可能有一定毒性的化学物质，实验室研究人员欲通过动物细胞培养的方法来鉴定它们是否有毒性并比较二者毒性的强弱。请你以一个研究人员的身份参与此项研究，完成下列有关问题：
(1)实验原理：_____________________。根据这种变异细胞占全部培养细胞的百分数(以下称Q值)，可判断该化学物质的毒性。
(2)材料用具：活的小白鼠胚胎、胰蛋白酶液、动物细胞培养液、动物细胞固定液、适宜浓度的龙胆紫溶液、适宜浓度的化学物质甲溶液、适宜浓度的化学物质乙溶液、蒸馏水、滴管、培养皿、剪刀、锥形瓶、恒温箱、载玻片、盖玻片、显微镜、小白鼠正常有丝分裂各时期的高倍显微照片。
(3)实验步骤：
Ⅰ．制备细胞悬浮液。把活的小白鼠胚胎放在培养皿中剪碎，转入锥形瓶中，加入胰蛋白酶液处理，使胚胎组织离散成单个细胞，再加入动物细胞培养液，制成细胞悬浮液。
Ⅱ．进行细胞培养。
①．取A、B、C3个洁净的培养瓶，______________；
②．向A、B两个培养瓶中分别加入等量的甲、乙溶液，C瓶中加入等量的蒸馏水，摇匀；
③．把3个培养瓶放在37℃的恒温箱中培养。
Ⅲ．制作临时装片。
①．当细胞增殖到大约8代左右时，同时从恒温箱中取出3个培养瓶，用胰蛋白酶液处理，加入动物细胞固定液，迅速杀死细胞并固定细胞分裂相；
②．静置一段时间后，分别从各培养瓶底部吸取适量的细胞悬浮液，滴在与培养瓶有相同编号的载玻片的中央，______________，3～5min后，盖上盖玻片。
Ⅳ．镜检和统计。
把临时装片放在显微镜下，先用低倍镜后用高倍镜，寻找处于______期的细胞，并与_________进行对比，统计并计算变异的细胞占该期细胞总数的百分数(Q值)。
(4)结果分析与结论：
①．经研究人员实验得知，A、B、C三个培养瓶的Q值依次为：QA=1.3%，QB=12.5%，QC=0.1%，由此可知该实验的结论是________________________。
②．在实验中，C培养瓶起________作用，C瓶的Q值说明_______________________。
参考答案：(1)有毒物质会使动物细胞发生染色体变异
(3)Ⅱ．①．分别放入等量的细胞悬浮液? Ⅲ．②．加1～2滴龙胆紫液染色? Ⅳ．有丝分裂中 ? 小白鼠正常细胞的有丝分裂中期高倍显微照片
(4)①．甲、乙两种化学物质均有毒性，且乙的毒性比甲的毒性大? ②．对照? 动物细胞在正常培养状态下染色体变异频率非常低
本题解析：
本题难度：困难
2、填空题 某研究小组进行药物试验时，以动物肝细胞为材料，测定药，物对体外培养细胞的毒性。供培养的细胞有甲、乙两种，甲细胞为肝肿瘤细胞，乙细胞为正常肝细胞。请回答下列有关动物细胞培养的问题：
(1)将数量相等的甲细胞和乙细胞分别置于培养瓶中培养，培养液及其他培养条件均相同。一段时间后，观察到甲细胞数量比乙细胞数量____。
(2)在动物细胞培养时，通常在合成培养基中加入适量血清，其原因是____。细胞培养应在含5%的CO2的恒温培养箱中进行，CO2的作用是________。
(3)在两种细胞生长过程中，当乙细胞铺满瓶壁时，其生长_____。药物试验需要大量细胞，两种细胞频繁传代，甲细胞比乙细胞可以传代的次数更______。若用动物的肝脏组织块制备肝细胞悬液，需用_____消化处理。
(4)为了防止细胞培养过程中细菌的污染，可向培养液中加入适量的_________。
(5)已知癌细胞X过量表达与肝肿瘤的发生密切相关，要试验一种抗肿瘤药物Y对甲细胞生长的影响，可将甲细胞分为A、B两组，A组细胞培养液中加入_______，B组细胞培养液中加入无菌生理盐水，经培养后，从A、B两组收集等量细胞，通过分别检测X基因在A、B两组细胞中的______或_______合成水平的差异，确定Y的药效。
参考答案：(1)多
(2)血清可以补充合成培养基中缺乏的物质? 维持培养液pH
(3)停止? ?多? 胰蛋白酶
(4)抗生素
(5)Y? mRNA? ?蛋白质
本题解析：
本题难度：一般
3、综合题 现有甲、乙两种可能有一定毒性的化学物质，实验室研究人员欲通过动物细胞培养的方法来鉴定它们是否有毒性，并比较二者毒性的强弱。请你以一个研究人员的身份参与此项研究，完成下列实验报告并回答有关问题。
实验原理：有毒物质能诱导细胞产生变异，根据这种变异细胞占全部培养细胞的百分数(以下称Q值)，可判断该化学物质的毒性。
实验材料：活的小白鼠胚胎。
药品用具：胰蛋白酶液、动物细胞培养液、动物细胞固定液、适宜浓度的龙胆紫溶液、滴管、培养皿、剪刀、锥形瓶、培养瓶、恒温箱、载玻片、盖玻片、显微镜、小白鼠正常体细胞有丝分裂各时期高倍显微照片。
实验步骤：
(1)制备细胞悬浮液：把活的小白鼠胚胎放在培养皿中剪碎，转入锥形瓶中，加入_________处理，使胚胎组织分散成单个细胞，再加入动物细胞培养液，制成细胞悬浮液。
(2)进行细胞培养：
①取A、B、C三个洁净的培养瓶，___________，加入等量的细胞悬浮液。
②向A培养瓶中加入化学物质甲，向B培养瓶中加入____________，向C瓶内加入等量的生理盐水，并将培养瓶摇匀。
③在实验中，C培养瓶起什么作用？___________。
(3)制作临时装片
①当细胞增殖到大约第8代左右时，同时从恒温箱中取出三个培养瓶，用胰蛋白酶液处理，使培养的细胞__________，再加入动物细胞固定液以便迅速杀死细胞并固定细胞。
②静置一段时间后，分别从各培养瓶底部吸取适量的细胞悬浮液，滴在与培养瓶有相同编号的载玻片的中央，用____________染色，3～5min后，盖上盖玻片。
(4)镜检和统计
把临时装片放在显微镜下，先用低倍镜后用高倍镜，寻找处于_________期的细胞，并与C组对比以确认发生变异的细胞，同时统计。
(5)结果与结论：经研究人员实验得知：A、B、C三个培养瓶的Q值依次为：QA=1.3%、QB=12.5%、QC=0.1%，由此可知该实验的结论是_________________。
参考答案：(1)胰蛋白酶液
(2)消毒灭菌；等量的化学物质乙；对照
(3)从瓶壁上脱落；适宜浓度的龙胆紫溶液
(4)细胞有丝分裂中期；该期变异的细胞占该期细胞总数的百分数(Q值)
(5)实验的结论是：甲、乙都是有毒性的，且乙的毒性大于甲
本题解析：
本题难度：困难
4、选择题 一般来说，动物细胞体外培养需要满足以下条件
①无毒的环境? ②无菌的环境? ③合成培养基需加血清、血浆? ④温度与动物体温相近 ⑤需要O2，不需要CO2 ?⑥CO2能调节培养液pH
[? ]
A．①②③④⑤⑥
B．①②③④
C．①③④⑤⑥
D．①②③④⑥
参考答案：D
本题解析：
本题难度：一般
5、选择题 下列对动物细胞培养的有关叙述正确的是：
[? ]
A．动物细胞培养的目的是获得大量的分泌蛋白
B．动物细胞培养前要用胰蛋白酶使细胞分散
C．细胞的癌变发生于原代培养向传代培养的过程中
D．培养至50代后的传代细胞称为细胞株
参考答案：B
本题解析：
本题难度：一般