高考生物知识点总结《PCR技术的基本操作和应用》高频考点巩固（2019年最新版）
时间:2019-05-28 06:37:02
1、选择题 限制性内切酶能识别特定的DNA序列并进行剪切，不同的限制性内切酶可以对不同的核苷酸序列进行剪切。现以3种不同的内切酶对6.2kb大小的DNA分子进行剪切，并用凝胶电泳分离各核苷酸片段，结果如图所示，则由此可推断该片断的酶切图谱是600)makesmallpic(this,600,1800);\' style=\"VERTICAL-ALIGN: middle\" border=\"0\" src=\"http://www_php168_com/91files/2016061100/lpi12wah4jc.gif\">
[? ]
A．600)makesmallpic(this,600,1800);\' style=\"VERTICAL-ALIGN: middle\" border=\"0\" src=\"http://www_php168_com/91files/2016061100/c24cjw1h2uk.gif\">
B．600)makesmallpic(this,600,1800);\' style=\"VERTICAL-ALIGN: middle\" border=\"0\" src=\"http://www_php168_com/91files/2016061100/ojdupiwyfkp.gif\">
C．600)makesmallpic(this,600,1800);\' style=\"VERTICAL-ALIGN: middle\" border=\"0\" src=\"http://www_php168_com/91files/2016061100/wyhjv1lpkwa.gif\">
D．600)makesmallpic(this,600,1800);\' style=\"VERTICAL-ALIGN: middle\" border=\"0\" src=\"http://www_php168_com/91files/2016061100/kc4draw3hxe.gif\">
参考答案：D
本题解析：
本题难度：一般
2、选择题 采用基因工程的方法培育抗虫棉，下列导入目的基因的方法正确的是
①将毒素蛋白注射到棉受精卵中 ②将编码毒素蛋白的DNA序列，注射到棉受精卵中 ③将编码毒素蛋白的DNA序列，与质粒重组，导入细菌，用该细菌感染棉的体细胞，再进行组织培养 ④将编码毒素蛋白的DNA序列，与细菌质粒重组，注射到棉的子房并进入受精卵
[? ]
A．①②
B．②③
C．③④
D．①④
参考答案：C
本题解析：
本题难度：一般
3、连线题 回答下列关于基因工程的问题下图1是培育表达人乳铁蛋白的乳腺生物反应器的技术路线，表中列出了几种限制酶识别序列及其切割位点，图2、图3中箭头表示相关限制酶的酶切位点。
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(1)若对图2中质粒进行改造，插入的SmaⅠ酶切位点越多，质粒的热稳定性如何变化，为什么？_____________。
(2)图中将人乳铁蛋白基因插入质粒，可以只用EcoRⅠ同时酶切质粒和人乳铁蛋白基因，也可以使用BamHⅠ和HindⅢ两种限制酶同时酶切质粒和人乳铁蛋白基因，后一个方法的优点在于可以防止__________。
(3)为了获取重组质粒，将切割后的质粒与目的基因片段混合，并加入__________酶。重组质粒中抗生素抗性基因的作用是为了_____________。
(4)图1过程①可采用的操作方法是____________，过程②可采用的生物技术是_____________。过程③可采用的生物技术是________________。
(5)分别从分子水平简述雌性转基因牛分泌人乳铁蛋白的过程是___________________。
参考答案：(1)SmaⅠ识别的DNA序列只有G和C，而G和C之间可以形成三个氢键，A和T之间可以形成二个氢键，所以SmaⅠ酶切位点越多，热稳定性就越高
(2)只使用EcoRⅠ，则质粒和目的基因两端的粘性末端相同，用连接酶连接时，会产生质粒和目的基因自身连接物，而利用BamHⅠ和HindⅢ剪切时，质粒和目的基因两端的粘性末端不同，用DNA连接酶连接时，不会产生自身连接产物。
(3)DNA连接酶? 筛选
(4)显微注射? ? 细胞培养? 胚胎移植技术
(5)DNA转录成mRNA，mRNA翻译成蛋白质
本题解析：
本题难度：困难
4、连线题 下图表示我国自主研发的转基因抗虫水稻“华恢1号”主要培育流程，据图回答：600)makesmallpic(this,600,1800);\' style=\"VERTICAL-ALIGN: middle\" border=\"0\" src=\"http://www_php168_com/91files/2016061100/eqq2g1kwb0b.gif\">
(1)①过程需要的工具酶是__________，④过程应用的生物技术主要是_________。
(2)杀虫基因(crylA)是人们根据几种Bt毒蛋白的分子结构没计并人工合成的，这属于_________工程技术。
(3)若限制酶Ⅱ切割DNA分子后形成的末端为，则该酶识别的核苷酸序列是__________。
(4)组建理想的载体需要对天然的质粒进行改造。上图是天然土壤农杆菌Ti质粒结构示意图(部分基因及部分限制性核酸内切酶作用位点)，据图分析：
①．人工改造时，要使抗虫基因表达，还应插入___________。
②．人工改造时用限制酶Ⅱ处理，其目的是：第一，去除质粒上的__________(基因)，保证T-DNA进入水稻细胞后不会引起细胞的无限分裂和生长；第二，使质粒带有单一限制酶作用位点，有利于__________；第三，使质粒大小合适，可以提高转化效率等。
③．若用限制酶1分别切割改造过的理想质粒和带有抗虫基因的DNA分子，并构成重组Ti质粒，分别以含四环素和卡那霉素的培养基培养已成功导入抗虫基因的水稻胚细胞，观察到的细胞生长的现象是_______。
(5)检测“华恢1号”抗虫性状的方法是____________。
参考答案：(1)限制性核酸内切酶和DNA连接酶? ?植物组织培养
(2)蛋白质
(3)GACGTC
(4)①．启动子? ②．tms和tmr? 目的基因(或外源DNA)准确插入? ③．在含卡那霉素的培养基中能够生长，而在含四环素的培养基中不能生长
(5)害虫抗性接种实验法(或相关描述)
本题解析：
本题难度：一般
5、选择题 基因工程中，构建基因表达载体时?
[? ]
A．需要包含启动子、终止子、标记基因、目的基因等
B．目的基因只能从目的生物中获取
C．启动子将启动表达载体的复制
D．剪切中形成的末端都可由T4DNA连接酶连接
参考答案：AD
本题解析：
本题难度：一般