高考生物知识点《PCR技术的基本操作和应用》答题技巧（2017年最新版） - 高考生物题库

1、填空题继哺乳动物乳腺生物反应器研究成功后，膀胱生物反应器的研究也取得了一定的进展。最近，科学家培育出了一种转基因小鼠，其膀胱上皮细胞可以合成人的生长激素并分泌到尿液中。请回答：
(1)将人的生长激素基因导入小鼠受体细胞，常用的方法是___________。
(2)进行基因转移时，通常要将外源基因转入_________中，原因是_________。
(3)通常采用_________技术检测外源基因是否插入了小鼠的基因组中。
(4)在研制膀胱生物反应器时，应使外源基因在小鼠的_________细胞中特异性表达。
(5)为使外源基因在后代长期保持，可将转基因小鼠体细胞的_________转入________细胞中构成重组细胞，使其发育成与供体具有相同性状的个体。该技术称为__________。

参考答案：(1)显微注射
(2)受精卵(或早期胚胎)?受精卵(或早期胚胎细胞)具有全能性，可使外源基因在相应的组织细胞中表达(3)DNA分子杂交(核酸探针)
(4)膀胱上皮
(5)细胞核? 去核的卵? 核移植(或克隆)

本题解析：

本题难度：一般

2、连线题降钙素是一种多肽类激素，临床上用于治疗骨质疏松症等。人的降钙素活性很低，半衰期较短。某科研机构为了研发一种活性高、半衰期长的新型降钙素，从预期新型降钙素的功能出发，推测相应的脱氧核苷酸序列，并人工合成了两条72个核苷酸的DNA 单链，两条链通过18 个碱基对形成部分双链DNA片段，再利用Klenow酶补平，获得双链DNA，过程如图。
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在此过程中发现，合成较长的核苷酸单链易产生缺失碱基的现象。分析回答下列问题：
(1)Klenow酶是一种________ 酶，合成的双链DNA 有________ 个碱基对。
(2) 获得的双链DNA 经EcoR Ⅰ(识别序列和切割位点-G↓AATTC-)和BamHⅠ(识别序列和切割位点-G↓GATCC-)双酶切后插入到大肠杆菌质粒中，筛选含重组质粒的大肠杆菌并进行DNA测序验证。
①．大肠杆菌是理想的受体细胞，这是因为它______________________。
②．将该目的基因导入大肠杆菌常用的方法是______________________。
③．设计EcoRⅠ和BamHⅠ双酶切的目的是_________________________。
④．要进行重组质粒的鉴定和选择，需要大肠杆菌质粒中含有______________。
⑤．在进行DNA测序时采用的方法是______________。经DNA测序表明，最初获得的多个重组质粒，均未发现完全正确的基因序列，最可能的原因是__________________。
(3)上述制备该新型降钙素，运用的现代生物工程技术是_______________。

参考答案：(1)DNA聚合? ? 126
(2)①．繁殖快、单细胞、遗传物质相对较少? ②．Ca+? ?③．保证目的基因和载体的定向连接(或防止目的基因和载体在酶切后产生的末端发生任意连接)? ④．标记基因? ?⑤．DNA分子杂交技术?合成的核苷酸单链仍较长，产生缺失碱基的现象
(3)蛋白质工程

本题解析：

本题难度：一般

3、选择题下列操作不属于基因表达载体构建过程的是

[? ]

A．用一定的限制酶切割质粒露出黏性末端
B．用同一种限制酶切割目的基因露出黏性末端
C．将切下的目的基因片段插入质粒切口处
D．将重组DNA导入受体细胞中

参考答案：D

本题解析：

本题难度：简单

4、选择题在已知某小片段基因碱基序列的情况下，获得该基因的最佳方法是
[? ]
A．用mRNA为模板反转录合成DNA
B．用4种脱氧核苷酸为原料人工合成
C．用PCR技术制备
D．有蛋白质的氨基酸序列推测mRNA

参考答案：B

本题解析：