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1、填空题  按复制机理可把质粒分为：____________、______________。

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本题答案：严紧型质粒；松弛性质粒
本题解析：试题答案严紧型质粒；松弛性质粒

2、问答题  简要叙述PCR-SSCP技术的原理。

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本题答案：聚合酶链式反应一单链构象多态性(PCR-SSCP)分析
本题解析：试题答案聚合酶链式反应一单链构象多态性(PCR-SSCP)分析技术为分子生物学的研究提供了一个简单、快捷、经济的手段。在该技术中，首先利用PCR技术扩增目的DNA，扩增时利用引物标记法或碱基掺入法使扩增的产物带有标记，如荧光物质、同位素、生物素等。然后将扩增产物变性并进行非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳，区别扩增产物一定长度核苷酸的单链DNA的碱基变化。ssDNA因碱基序列的变异而导致构象改变，其泳动速度必然发生改变，从而将变异的DNA与正常的DNA区分开来。该技术的优点是无需经特殊的限制性内切酶作用，直接对PCR扩增产物或其他方法制备的DNA片段进行 分离，测出单链的突变点。

3、名词解释  操纵子

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本题答案：原核生物的几个功能相关的结构基因往往排列在一起，在同一
本题解析：试题答案原核生物的几个功能相关的结构基因往往排列在一起，在同一调控机制下转录成一段mRNA，然后分别翻译成几种不同的蛋白质。这些蛋白可能是催化某一代谢过程的酶，或共同完成某种功能。这些功能相关的结构基因与位于同一序列上游的启动子、操纵基因共同构成一个转录单位，称为操纵子。操纵子为原核生物基因表达的基本单位。

4、单项选择题  肿瘤的发生发展经过不包括()

A．激发阶段
B．浸润阶段
C．促发阶段
D．转移阶段
E．结束阶段

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本题答案：E
本题解析：暂无解析

5、判断题  在DNA杂交后洗脱过程中在一定的温度下，相同的时间内，表现为温度越高洗脱越彻底()

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本题答案：对
本题解析：暂无解析

6、单项选择题  松弛型质粒()

A．在宿主细胞中拷贝数较多
B．可用氯霉素扩增
C．复制时受宿主染色体的控制
D．一般没有选择标记
E．上述A、B两项正确

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本题答案：E
本题解析：暂无解析

7、问答题  简述随机PCR实验步骤。

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本题答案：(1)先进行寡核苷酸的设计与合成：随机序列区，这是结合
本题解析：试题答案(1)先进行寡核苷酸的设计与合成：随机序 91ExAM.org列区，这是结合蛋白质的区域，长度从几个到几十个碱基不等。随机序列区两侧是确定序列区，长度一般为15-20个碱基。
(2)合成后的寡核苷酸经纯化后进行标记，制备成含有随机序列的寡核苷酸探针。
(3)进行多次的凝胶滞后实验，将随机序列中能够结合蛋白的特异性探针序列分离出来，即先经凝胶滞后实验纯化探针，经PCR扩增，再经凝胶滞后实验纯化，PCR扩增，如此多次直到只有特异性探针为止，最后将纯化的特异结合序列探针PCR扩增后，进行克隆和序列分析，序列测定后，列表统计随机序列区各碱基出现的数量，计算每一个位置上各碱基出现的频率，最终确定蛋白质结合位点。

8、判断题  应用TaqDNA聚合酶进行PCR时，为了保持pH稳定，一般用10～50mmol/L的TrisHCL把反应体系的pH值调整为8.5左右，在扩增时，当温度上升至72℃时，反应体系的pH在7.2左右()

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本题答案：对
本题解析：暂无解析

9、单项选择题  用原位杂交法鉴定基因时，正确的是()

A．需要基因的表达
B．事实上是按照碱基配对原则进行的检验技 术
C．不能在正常细胞体中来进行
D．应该在液相中进行
E．可以对组织细胞进行一边培养一边进行操作

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本题答案：B
本题解析：暂无解析

10、名词解释  启动子

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本题答案：RNA聚合酶特异性识别和结合的DNA序列。
本题解析：试题答案RNA聚合酶特异性识别和结合的DNA序列。

11、判断题  蛋白质的溶解度随温度的增高表现为增加()

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本题答案：错
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12、问答题  简述斑点杂交的过程。

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本题答案：斑点杂交是一种DNA杂交法，它是将DNA待测样品直接点
本题解析：试题答案斑点杂交是一种DNA杂交法，它是将DNA待测样品直接点加在硝酸纤维素膜上使其成为斑点，然后与特异DNA探针进行杂交，以分析DNA样品之间的同源性。
斑点杂交的过程是：
(1)取硝酸纤维薄膜一张，铺在一描有小方格的纸上，以确定点样位点，每格中最多可点样品DNA10μl。
(2)加样可分多次进行，待前一次样品干燥后再加第二次，每次约1～2μl，这样可避免斑点扩大。
(3)待样品干燥后，让硝酸纤维素薄膜漂浮在0.5MNa0H、1.5MNaCl液面上，变性15min。
(4)取出薄膜在滤纸上吸干。
(5)再漂浮在0.5MTris-HCL(pH7.5)、1.5MNaCl液面上中和15min。在滤纸上晾干后，夹在两张纸之间，80℃烘干2h，即可进行杂交。
(6)同位素探针的杂交：①将杂交膜以6×SSP浸润2min；②将湿润的杂交膜装人杂交袋，加人预杂交液，置42℃水浴2～6h；③将已标记的双链DNA探针于95℃～100℃加热5～10min后冰浴骤冷；④向杂交袋中加入已变性的标记探针，置42℃水浴摇床杂交6～12h；⑤小心取出杂交膜并洗膜；⑥干膜。

13、单项选择题  基因工程中所用的质粒载体大多是改造过的，真正的天然质粒载体很少，在下列载体中只有被视为用作基因工程载体的天然质粒载体()

A．pBR322
B．pSC101
C．pUB110
D．pUC18
E．pUC28

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本题答案：B
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14、单项选择题  分子生物学检验技术不能用于以下临床实验诊断的哪些方面()

A．病毒的检测
B．支原体的检测
C．亲子关系的鉴定
D．个体身份的识别
E．细菌感染能力的鉴定

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本题答案：E
本题解析：暂无解析

15、填空题  重组DNA分子构建目的基因或DNA片段可来源：____________________、__________________、________________。

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本题答案：基因组DNA；cDNA；人工合成的DNA
本题解析：试题答案基因组DNA；cDNA；人工合成的DNA

16、名词解释  R质粒

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本题答案：R质粒是指抗药性质粒或耐药性质粒，可以使宿主菌获得耐受
本题解析：试题答案R质粒是指抗药性质粒或耐药性质粒，可以使宿主菌获得耐受相应抗生素的能力。

17、单项选择题  在HIV基因组中，编码结构蛋白的是()

A．tat
B．rev
C．vpr
D．gag
E．vpu

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本题答案：D
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18、名词解释  转位因子

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本题答案：指可移动的基因成分，即能在一个DNA分子内部或两个DN
本题解析：试题答案指可移动的基因成分，即能在一个DNA分子内部或两个DNA分子之间移动的DNA片段。

19、单项选择题  芯片杂交的操作顺序是()

A．封闭液预杂交，杂交，清洗，干燥，检测
B．封闭液预杂交，干燥，杂交，清洗，检测
C．杂交，封闭液预杂交，清洗，干燥，检测
D．封闭液预杂交，清洗，杂交，干燥，检测
E．封闭液预杂交，杂交，干燥，清洗，检测

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本题答案：A
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20、问答题  试述凝胶电泳检测DNA的基本原理。

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本题答案：DNA片段属于带电质点。在一定电场作用下，一定大小的D
本题解析：试题答案DNA片段属于带电质点。在一定电场作用下，一定大小的DNA片段以不同的速度通过不同浓度的琼脂糖凝胶，DNA的迁移率(μ)对数和凝胶浓度之间的线性关系遵循下列关系，即：lgμ0=lgμ-KrC，μ0的为自由电泳迁移率，Kr为滞留系数，是与凝胶性质和迁移分子大小及形状有关的常数。因此利用不同浓度的凝胶可以分辨不同大小的DNA片段。溴化乙锭(BB)是一种荧光染料，这种物质含有插入DNA积叠碱基之间的平面结构。这一结构的位置固定，与碱基很接近，使染料与DNA紧密结合。在紫外线照射下，可产生较强的荧光，故可以使用该方法进行DNA的鉴别。

21、填空题  酚是蛋白变性剂，用酚抽提细胞DNA时，具有两方面的作用：(1)________________________(2)______________________。

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本题答案：蛋白质变性沉淀；抑制DNA酶活性
本题解析：试题答案蛋白质变性沉淀；抑制DNA酶活性

22、单项选择题  编码蛋白质都能与GTP结合的癌基因家族为()

A．myb
B．myc
C．sis
D．ras
E．erb

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本题答案：D
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23、名词解释  Plasmid

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本题答案：质粒是独立与细菌细胞染色体以外，能自主复制的共价闭合环
本题解析：试题答案质粒是独立与细菌细胞染色体以外，能自主复制的共价闭合环状DNA分子。

24、单项选择题  丙型肝炎病毒基因组中有ORF几个()

A．1个
B．2个
C．3个
D．4个
E．5个

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本题答案：A
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25、填空题   ;细胞破裂的方法中，物理法有：_____________、________、_____________、______________和__________。

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本题答 91exam .org案：反复冻融法；超声法；冷热交替法；低渗裂解法
本题解析：试题答案反复冻融法；超声法；冷热交替法；低渗裂解法

26、填空题  环状质粒的转化效率很低，通常是线性双链DNA转化效率的__________________。

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本题答案：1/1000
本题解析：试题答案1/1000

27、判断题  PCR技术待扩增的靶基因在人工合成引物的诱导下，合成大量的核蛋白()

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本题答案：错
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28、判断题  人及哺乳动物是真核细胞生物体()

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本题答案：对
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29、名词解释  PCD(细胞程序性死亡)

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本题答案：PCD又称为细胞凋亡(apoptosis)或细胞自杀(
本题解析：试题答案PCD又称为细胞凋亡(apoptosis)或细胞自杀(cellsuicide)，是指为维持内环境稳定，由基因控制的细胞在一些诱导因素(如紫外线，生长因子缺失等)作用下，自主的有序性死亡。也有人认为PCD与细胞凋亡的含义不同，细胞凋亡仅为PCD的一种特殊形式。

30、问答题  原癌基因激活机制表现在哪些方面?

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本题答案：原癌基因具有正常的生理功能，被激活时又具有致癌作用。原
本题解析：试题答案原癌基因具有正常的生理功能，被激活时又具有致癌作用。原癌基因表现为致癌作用主要通过以下方式进行的。
(1)原癌基因点突变，表现为由于核苷酸某个碱基突变，影响到它所决定的氨基酸变异，由一种氨基酸转变为另一种氨基酸，如果出现某个特殊位置发生改变，必然出现蛋白质功能的变化，从而表现出不同的蛋白质功能。
(2)获得外源性启动子而激活，表现为在原癌基因的上游插入外源性启动子或增强子激活原癌基因，使表达产物增多。
(3)DNA分子中的甲基化对抑制基因的转录具有重要的作用，如果甲基化水平降低，可激活原癌基因。
(4)在细胞中出现了基因不同程度的扩增，表现为决定的蛋白质大量表达，相应的产物增加。
(5)从基因内部来讲，如果出现基因易位或染色体出现重排，使得原癌基因转移到某些较强的启动子或增强字附近，因而被激活，使得相应蛋白质得到大量增加。

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